[摘要]：目的：对不同产地黄精原植物(黄精、多花黄精、滇黄精)的主要化学成分进行测定和主成分分析，为鉴定、筛选和保护优良黄精种质资源提供理论基础。方法：用分光光度计法测定黄精多糖、总酚和总黄酮含量，HPLC测定薯蓣皂苷元含量。结果：广东韶关市多花黄精中黄精多糖含量最高为14.%，湖北咸宁市多花黄精中薯蓣皂苷元含量最高为8.mg/g，河南卢氏县的黄精中总酚含量最高为0.mg/g，贵州贵阳市的多花黄精中总黄酮含量最高为0.mg/g；黄精的主成分为黄精多糖和薯蓣皂苷元。不同产地不同种间黄精的主要化学成分含量差异显著，同一种内不同产地黄精的主要化学成分含量亦差异显著。结论：黄精优良种质的筛选应以黄精多糖含量和薯蓣皂苷元含量共同作为评价指标。[关键词]：黄精;多花黄精;滇黄精;黄精多糖;薯蓣皂苷元黄精为百合科黄精属多年生草本植物黄精PolygonatumsibiricumRed.、多花黄精PolygonatumcyrtonemaHua.、滇黄精PolygonatumkingianumColl.etHemsl.的干燥根茎〔1〕。在我国，黄精已有多年的药用历史，现为紧缺的大宗药材之一〔2〕。黄精味甘，性平，归脾、肺、肾经，具有补气养阴、健脾、润肺、益肾等功能〔1〕；而现代药理学研究表明，黄精具有提高免疫力、降血糖、降血脂、抗炎、抗菌、抗病毒、抗肿瘤、抗衰老、提高记忆力等作用〔3-9〕。目前，黄精的人工栽培技术还不成熟，种子育种程序繁琐、周期长，严重限制了黄精的可持续利用。因此，保护黄精种质资源成为当务之急。本研究通过比较33个产地的野生黄精的黄精多糖、薯蓣皂苷元、总黄酮和总酚等化学成分的含量并进行主成分分析，以此来鉴定和筛选优良的黄精种质资源，为黄精种质资源的收集与保护提供理论基础。1材料与仪器从河南、安徽、贵州、重庆、广东、云南等省市的33个产地收集野生黄精、多花黄精和滇黄精的新鲜根茎。所采样品经西北农林科技大学生命学院张跃进教授鉴定，样品收集地和鉴定结果见表1。洗净、切片，于45℃烘箱中烘干，磨粉，过80目筛备用。葡萄糖标准品(批号：，上海源叶生物科技有限公司)；薯蓣皂苷元对照品(批号：-01，中国食品药品检定研究院)；芦丁对照品(批号：，国药集团化学试剂有限公司)；没食子酸对照品(批号：K，美国Sigma-Aldich公司)。色谱级乙腈购自FisherScientific(Fairlawn，NJ，USA)，蒽酮、浓硫酸、无水乙醇、盐酸、氯仿、甲醇、NaNO2、Al(NO3)3、NaOH、福林酚、Na2CO3等试剂均为国产分析纯。Waters二元高效液相色谱仪，Waters二极管列阵检测器，WatersUV-紫外检测器，Empower2色谱分析软件(美国Waters公司)；RE-52AA旋转蒸发器(上海亚荣生化仪器厂)；KQ-B型超声清洗器(昆山市超声仪器有限公司)；UV-H型紫外可见分光光度计(尤尼柯上海仪器有限公司)；XMTD-型恒温水浴锅(上海精宏实验设备有限公司)。2方法2.1黄精多糖含量的测定黄精多糖含量的测定参照年版中国药典一部中的方法〔1〕。实验结果表明，葡萄糖标准品溶液浓度在0.~0.mg/mL范围内线性关系良好。测定黄精多糖含量的标准曲线为Y=3.X+0.，r=0.。2.2薯蓣皂苷元含量的测定〔10〕2.2.1色谱条件WatersXB-C18色谱柱(mm×4.6mm，5μm)，以乙腈-水(94∶6)为流动相等度洗脱；流速：1.0mL/min；柱温：30℃；检测波长：nm；进样量：20μL。2.2.2标准曲线的制备精密称取薯蓣皂苷元对照品8.00mg，置25mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，作为对照品溶液。精密吸取对照品溶液0.5、1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0mL，分别置于10mL量瓶中，加甲醇定容，摇匀。以对照品进样量为横坐标，峰面积为纵坐标绘制标准曲线。实验结果表明，薯蓣皂苷元对照品进样量在0.~0.mg范围内与峰面积线性关系良好，薯蓣皂苷元的标准曲线为Y=X+，r=0.。薯蓣皂苷元的方法学考察结果为：精密度试验、重复性试验和稳定性试验的RSD分别为0.35%、0.02%和1.25%；加样回收率为94.41%，RSD为1.16%。2.2.3样品中薯蓣皂苷元含量的测定取黄精样品细粉2g，精密称定，置烧瓶内，精密加入乙醇50mL，摇匀，称重，加热回流4h，放冷，再称定重量，过滤，取20mL续冷液，蒸干乙醇，残渣加80mL3mol/L的盐酸溶液溶解，沸水回流水解4h，冷却，移至分液漏斗中，加氯仿40mL(20、10、10mL)萃取3次，合并氯仿液，减压回收氯仿至干，残渣加甲醇溶解，移至1mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀。进样前用0.45μm的微孔滤膜过滤。2.3总酚含量的测定〔11〕2.3.1没食子酸标准曲线的制备精密称取没食子酸对照品13mg，置于50mL量瓶中，加入20mL70%乙醇。超声使其充分溶解。用70%乙醇定容，摇匀备用。分别精密吸取对照品溶液0、20、40、60、80、、、、、μL置于5mL量瓶中，依次加入3.2mL蒸馏水，福林酚显色剂μL，充分振荡后静置6~8min，加入15%Na2CO3溶液μL。摇匀，在室温下避光放置反应2h。在nm波长处测定吸光值。以对照品浓度为横坐标，吸光度为纵坐标绘制标准曲线。实验结果表明，没食子酸对照品溶液浓度在0~0.mg/mL范围内与吸光度线性关系良好，没食子酸标准曲线为Y=27.X+0.，r=0.。2.3.2样品总酚含量测定精确称取黄精细粉1g于试管中，加入10mL70%乙醇，超声(W，40kHz)提取30min，过滤，取滤液。反复提取3次。旋干，并用70%乙醇定容至1mL。准确吸取40μL，按“2.3.1”项下方法测定黄精总酚含量。2.4总黄酮含量的测定〔11〕2.4.1芦丁标准曲线的绘制精密称取芦丁对照品20mg，用50%乙醇超声溶解，转移至50mL量瓶中并定容，充分摇匀，备用。分别吸取芦丁对照品溶液0、0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL，置于10mL量瓶中。然后加入0.3mL5%NaNO2，摇匀，静置6min，再加入0.3mL10%Al(NO3)3，摇匀，静置6min，最后再加入2mL4%NaOH，以50%乙醇定容，静置15min，以空白试剂作对照，在nm处测定吸光度。以对照品浓度为横坐标，吸光度为纵坐标绘制标准曲线。实验结果表明，芦丁对照品溶液浓度在0~0.mg/mL范围内与吸光度线性关系良好，芦丁标准曲线为Y=10.73X+0.，r=0.。2.4.2样品总黄酮含量的测定精密称取黄精细粉1.5g，置于20mL具塞试管中，加入15mL50%的乙醇溶液(加入1%的盐酸)，超声(W，40kHz)提取1h，过滤，旋干，用50%乙醇定容至1.5mL于EP管中。取0.3mL，按“2.4.1”项下方法测定和计算黄精总黄酮含量。3结果与分析

3.1不同产地黄精多糖含量的比较

不同产地黄精多糖含量呈正态分布，均数为6.%时达到最高峰，这与中国药典中的规定一致。不同产地不同种黄精的多糖含量之间差异显著。广东韶关市多花黄精的黄精多糖含量最高，为14.%；含量最低为江西信丰县的多花黄精，为2.%(表2)。不同种间黄精多糖含量为：多花黄精黄精滇黄精，浙江地区的多花黄精中黄精多糖含量明显相对较高，达到了9.47%。对比实验结果发现，同一种内不同产地黄精多糖含量亦存在显著性差异。黄精中黄精多糖含量最高12.%，约是含量最低4.%的3倍；多花黄精中黄精多糖含量最高14.%，约为最低2.%的6.3倍；滇黄精中黄精多糖含量最高7.%，约为最低3.%的2.5倍(表2)。3.2不同产地黄精薯蓣皂苷元含量的比较不同产地黄精的薯蓣皂苷元含量同样呈正态分布，均数为2.mg/g时达到最高峰。不同产地不同种间黄精中薯蓣皂苷元含量之间存在显著差异，湖北咸宁市的多花黄精中含量最高，为8.mg/g；浙江仙居县的多花黄精中含量最低，为0.mg/g(表2)。不同种间黄精中薯蓣皂苷元含量为：多花黄精滇黄精黄精。同一种内不同产地黄精中薯蓣皂苷元含量存在显著性差异。黄精中薯蓣皂苷元含量最高2.mg/g，约是含量最低0.mg/g的7倍；多花黄精中薯蓣皂苷元含量最高8.mg/g，约为最低0.mg/g的倍；滇黄精中薯蓣皂苷元含量最高2.mg/g，约为最低1.mg/g的2倍(表2)。3.3不同产地黄精中总酚含量的比较不同产地黄精中总酚含量呈正态分布，均数在0.mg/g时达到最高峰。不同产地不同种间黄精中总酚含量存在显著差异，其中含量最高的为河南卢氏县的黄精，为0.mg/g；含量最低的为广西崇左市的滇黄精，只有0.mg/g(表2)。不同种间黄精中总酚含量：黄精多花黄精≈滇黄精。同一种内不同产地黄精中总酚含量存在显著性差异。黄精中总酚含量最高0.mg/g，约是含量最低0.mg/g的3.5倍；多花黄精中总酚含量最高0.mg/g，约为最低0.mg/g的5.5倍；滇黄精中总酚含量最高0.mg/g，约为最低0.mg/g的4倍(表2)。3.4不同产地黄精中总黄酮含量的比较不同产地黄精中总黄酮含量呈正态分布，均数在0.mg/g时达到最高峰。不同地区不同种间黄精中总黄酮含量存在显著差异，其中含量最高的为河南鲁山县的黄精，达到0.mg/g；含量最低的是浙江桐乡市的多花黄精，为0.mg/g(表2)。不同种间黄精中总黄酮含量：黄精滇黄精多花黄精。同一种内不同产地黄精中总黄酮含量差异显著。黄精中总黄酮含量最高0.mg/g，约是含量最低0.mg/g的2倍；多花黄精中总黄酮含量最高0.mg/g，为最低0.mg/g的8.5倍；滇黄精中总黄酮含量最高0.mg/g，为最低0.mg/g的2倍(表2)。3.5黄精的主成分分析利用SPSS22.0软件进行主成分分析。结果表明，黄精的主要成分为黄精多糖与薯蓣皂苷元，这两种成分的方差累加占到总方差的62.19%，其中黄精多糖的方差为1.，薯蓣皂苷元的方差为1.；各地区的综合得分计算公式为：Y=0.×黄精多糖得分+0.×薯蓣皂苷元得分；依据综合得分进行排名，前3位依次为S3、S6、S5。4结论与讨论由于气候、纬度、地理位置、光照、水肥等多种因子的影响，不同产地不同种间黄精中黄精多糖含量、薯蓣皂苷元含量、总酚与总黄酮含量存在显著差异；同时，同一种内不同产地各化学成分含量之间也存在显著差异。依据中国药典的规定，不同产地中黄精质量最优为广东韶关市的多花黄精；而同时参考黄精多糖和薯蓣皂苷元的含量，质量最优则为河南卢氏县的黄精。现代研究者认为，对于中草药或植物药来说，单一的化学成分含量不足以证明该中草药的药用价值。因此，本研究认为，黄精的质量评价应以黄精多糖和薯蓣皂苷元的含量共同作为评价指标。

参考文献：略

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焦劼，陈黎明，孙瑞泽，刘峰，马存德，梁宗锁-《不同产地黄精主要化学成分比较及主成分分析》上一篇：HPLC特征指纹图谱结合化学计量学评价不同寄主来源的桑寄生药材质量


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